辛伐他汀对内皮祖细胞扩增及黏附能力的影响

                                宋显晶  杨萍


目的：通过体外培养人脐静脉血血管内皮祖细胞，观察辛伐他汀对血管内皮祖细胞扩增及黏附能力的影响。

方法：密度梯度离心法分离培养人脐静脉血血管内皮祖细胞。通过免疫荧光法观察内皮细胞吸收乙酰化低密度脂蛋白和荆豆凝血素Ⅰ情况，流式细胞仪定量检测血管内皮祖细胞表面CD133、CD34和KDR抗原表达阳性率来鉴定血管内皮祖细胞。倒置显微镜下观察血管内皮祖细胞形态学变化，计数细胞并绘制生长曲线。实验按M199培养基含辛伐他汀纯品浓度不同分5组，分别为0，0.01，0.1，1，10μmol/L辛伐他汀组，其中0μmol/L作对照。四甲基偶氮唑盐比色法观察血管内皮祖细胞增殖情况，计数贴壁细胞数法评价血管内皮祖细胞的黏附程度。主要观察指标：原代培养血管内皮祖细胞形态变化；各组细胞增殖及黏附能力。

结果：①培养细胞呈长梭形，接种2~4 d梭形形态细胞较少，为细胞生长的潜伏期；6~10 d贴壁梭形细胞逐渐增多，为对数增殖期；10~14 d细胞融合呈集落样生长，梭形细胞明显增多，进入生长平台期。②激光共聚焦显微镜鉴定乙酰化低密度脂蛋白、荆豆凝血素Ⅰ双染阳性的细胞为正在分化的血管内皮祖细胞。③流式细胞仪检测细胞表达CD133、CD34和KDR抗原的阳性率分别为（7.30±2.71）％、（42.00±6.42）％，（89.30±10.45）％。④四甲基偶氮唑盐比色结果表明各浓度组血管内皮祖细胞增殖活力、贴壁的血管内皮祖细胞数均较对组增强（P<0.05）；但以1μmol/L浓度下血管内皮祖细胞增殖活力最强

结论：辛伐他汀能增强体外培养血管内皮祖细胞的扩增及黏附能力。